文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 结肠癌组织标本

    1.1.2 主要试剂与仪器

    1.1.3 细胞

1.2 方法

    1.2.1 生物信息学分析

    1.2.2 免疫组织化学检测ETV4在组织中的表达

    1.2.3 细胞转染

    1.2.4 RT-qPCR

    1.2.5 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭

    1.2.6 Western blot实验

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 ETV4在结肠癌组织及细胞系中表达显著升高

2.2 ETV4促进结肠癌的侵袭能力

2.3 MMP7是ETV4的下游基因

2.4 ETV4通过MMP7促进结肠癌的侵袭能力

3 讨论

文章摘要:目的分析E26转录因子变异体4(ETV4)的表达与结肠癌临床病理参数间的关系,并探讨其对结肠癌细胞侵袭能力的作用及分子机制。方法通过GEPIA和R2在线生物信息学分析并挖掘结肠癌中高表达基因。免疫组化法检测结肠癌组织及配对癌旁组织中ETV4蛋白表达情况,并分析ETV4表达与结肠癌病理参数之间的关系。RT-qPCR检测结肠癌细胞系和永生化正常人结肠上皮细胞中ETV4的mRNA表达情况。在LOVO细胞中沉默或过表达ETV4后,用Transwell法观察细胞侵袭能力的改变。用生物信息学分析预测ETV4的下游基因,并通过Western blot进行验证。结果 GEPIA和R2在线生物信息学分析结果显示,ETV4和MMP7在结肠癌癌组织中高表达。免疫组化结果显示,与配对癌旁组织比较,ETV4在癌组织中表达升高,且其表达水平与肿瘤的T、N、M分期正相关。RT-qPCR结果显示,结肠癌细胞系HCT116、LS174T、SW480、LOVO、SW620和RKO中ETV4 mRNA的表达水平明显高于永生化正常人结肠上皮细胞FHC。Transwell实验结果显示,ETV4促进LOVO细胞的侵袭能力。R2在线分析发现ETV4和MMP7呈正相关。Western blot结果显示,在LOVO细胞中ETV4对MMP7具有正向调控作用;同时恢复实验显示,沉默MMP7逆转了ETV4过表达对LOVO细胞侵袭能力的促进作用。结论 ETV4在结肠癌组织及细胞系中表达升高,并通过上调MMP7基因促进结肠癌的侵袭能力。

文章关键词:ETV4,MMP7,结肠癌,侵袭,

项目基金:河南省自然科学基金(编号：202300410326),河南省医学科技攻关计划联合共建项目(编号：2018020341),